禽霍乱与大肠杆菌病多价蜂胶二联灭活疫苗的研究

为研制绿色环保型的禽霍乱与大肠杆菌病多价二联灭活疫苗,本研究以禽多杀性巴氏杆菌强毒株G48-1、G48-2和禽致病性大肠杆菌常见血清型01/0154、02/086、078、018、08/093等为制苗菌株,分别以改良马丁琼脂和马丁肉汤进行固体表面培养和高密度发酵培养制备抗原,将灭活的抗原铺以具有广谱生物学活性的天然物质-蜂胶为免疫增强剂,已拥有完全自主知识产权的纳米蜂胶疫苗制造工艺技术平台制备禽霍乱与大肠杆菌病多价蜂胶二联灭活疫苗.试验结果表明,疫苗安全可靠,无明显的干扰现象,免疫后5～7 d产生坚强保护力,对禽霍乱和鸡大肠杆菌病的近期保护率均为100%.以实验动物小鼠代替本动物进行二联疫苗效检取得成功,本效检方法可缩短检验期限7 d,降低检验成本,具有更敏感、更特异、更客观、更简便等特点.禽霍乱采用攻毒法,大肠杆菌采用改良微量凝集试验测定抗体效价法测定禽-大二联疫苗的免疫期与保存期.结果表明,该疫苗的免疫期为6个月以上,-10℃保存期为18个月;4℃～8℃为12个月;15℃～30℃为6个月.田间免疫试验表明,疫苗安全可靠,现场应用已逾2亿羽份,效果良好.     

猪瘟淋脾毒(耐热保护剂)活疫苗的热稳定性研究

通过对3种不同配方的冻干保护剂和冻干曲线与猪瘟兔化弱毒相溶性的比较研究,成功研制了适用于猪瘟淋脾毒活疫苗的耐热保护剂.用这种保护剂生产的该疫苗经37 ℃保存10 d的耐老化试验及在2～8 ℃保存12个月后仍然符合产品质量标准的要求.经4 770余头份疫苗的田间试验,证明该产品安全、有效,且便于运输和使用,显示出良好的热稳定性能.     

盐酸多西环素对鸡白痢和禽霍乱的疗效试验

以诺氟沙星为对照药物,研究了盐酸多西环素治疗鸡白痢病和禽霍乱的效果.结果盐酸多西环素对鸡白痢的治疗效果显著好于诺氟沙星,治愈率、死亡率差异显著（P＜0.05）;盐酸多西环素对禽霍乱的治疗效果好于诺氟沙星,治愈率差异不显著（P＞0.05）,而死亡率差异显著（P＜0.05）.     

猪瘟兔化弱毒株E~(rns)基因在大肠埃希氏菌中的表达、纯化

将猪瘟兔化弱毒株Erns基因亚克隆到原核表达载体pGEX-6p-1中,经PCR和双酶切鉴定以及序列分析,表明已成功构建了重组质粒。将重组质粒转化到大肠埃希氏菌BL21(DE3)中进行表达,经SDS-PAGE和Western-Blot检测,结果表明,融合表达蛋白的分子量约为55kD,目的蛋白表达量占菌体总蛋白的45%。表达蛋白与兔抗CSFV多抗发生特异性反应,具有良好的反应原性。利用GST亲和层析柱对Erns融合蛋白进行了纯化。     

集约化养猪场猪瘟免疫程序的研究

以一家正在流行猪瘟的集约化养猪场基本条件完全相同的两个万头商品猪生产线为实验群体,利用兽医流行病学中自然实验的方法,对三种猪瘟免疫程序进行研究,经历了二年共四个实验阶段,从中筛选出适用于集约化养猪场商品猪群有效的猪瘟免疫程序,该程序包括二次免疫,即首免为乳前免疫,二免为３０～３５日龄免疫。     

规模化猪场猪瘟、细小病毒、口蹄疫抗体水平监测和免疫效果分析

应用正向间接血凝试验检测来自６个省（市）的４４个规模化猪场共７５４份血清中的猪瘟抗体水平,其中３３１份猪瘟血清抗体低于或等于１：８,占４４．１６％,低于临界保护线,４２１份血清的抗体水平大于或等于１：１６,占５５．８４％,可视事格;母猪、育肥猪和仔猪的免疫合格率分别为６６．７％、３７．９６％、２２．０２％。母猪、育肥猪、仔猪血清中猪瘟抗体为零的百分比和份数分别为７．２６％（３２/４４１）、１５．３     

鸡霍乱病原分离鉴定及组织灭活苗研制

从疑是鸡霍乱的病鸡肝脏中分离多杀性巴氏杆菌并进行鉴定,用病鸡肝脏研制出鸡霍乱组织灭活苗,用于发病鸡群的紧急接种治疗和正常免疫预防,用于紧急治疗时,鸡霍乱组织灭活苗和敏感抗菌药同时使用,用于正常免疫预防时,鸡霍乱组织灭活苗和弱毒菌联合使用。通过临床试验取得了良好效果,鸡霍乱组织灭活苗制备工艺简单,针对性强,效果好,非常值得基层推广应用。     

新疆乌鲁木齐垦区猪瘟免疫程序的确定

多年来,新疆乌鲁木齐垦区没有一个科学合理的猪瘟免疫程序,免疫程序较为混乱,免疫效果亦不同。为探讨一种适合本地区的猪瘟免疫程序,有效预防猪瘟,而进行本试验。本试验是对仔猪猪瘟母源抗体的跟踪监测结果,对不同日龄仔猪免疫猪瘟疫苗,然后采集血样,检测猪瘟抗体效价。根据效价不断校正、最终确定为科学合理的猪瘟免疫程序,其免疫程序是:猪瘟的超前免疫,剂量1头份,根据抗体效价下降情况,35日龄进行二免,剂量4头份;仔猪常规免疫:一免30日龄、剂量2头份;二免50日龄、剂量4头份;生产母猪免疫:配种前(后)15d进行免疫,剂量4头份。应用此免疫程序的同时,严格遵守环境卫生消毒制度,再未发生猪瘟,抵御了猪瘟野毒的侵袋,提高了猪瘟防治水平,促进垦区生猪养殖向健康稳定的方向发展。     

广西猪瘟流行毒与C-株疫苗毒gp55（E2）主要抗原区DNA序列差异的比较

采用反转录 PCR(RT- PCR)和套式 PCR(nest Polym erase Chain Reaction,n PCR)扩增出 3株广西省近期 (1999～ 2 0 0 0年 )猪瘟流行野毒的 E2 基因 ,将其分别克隆于 PMD- 18T载体上并进行了核苷酸序列测定 ,根据 C株及 Brescia和 Alfort株确定起始氨基酸三联体的正确位置后进行氨基酸序列推导 ,同时进行了同源性比较及 E2 糖蛋白结构的分析。结果表明 ,所测 3株 HCV E2 基因的长度均为 1170 bp,编码的氨基酸序列均包括完整信号肽序列和部分跨膜序列 ,共由 384个氨基酸组成。3株流行毒的 E2 基因核苷酸序列同源性为 90 .10 %～ 98.5 4%,相应的氨基酸序列同源性为 89.5 9%～ 97.92 %。这 3株流行毒与 C-株兔脾组织毒 (疫苗种毒 ) E2 基因的核苷酸序列同源性为 82 .87%～ 83.99%,相应的氨基酸序列同源性为 86 .98%～ 90 .10 %,表明近期猪瘟流行毒与 C-株疫苗毒的 gp5 5蛋白之间存在一定的差异。     

关于现场非典型猪瘟的早期诊断和防治的探讨

本文报告了1974—1987年间在31个猪瘟疫点共剖检了178例非典型猪瘟病例,其临床流行病学、病理变化与典型猪瘟的表现有所不同。据此提出了对非典型猪瘟病猪的诊断要点和防治措施。